您当前位置:首页 >> 新闻中心 新闻中心 News Center

生物实验中的封闭剂

发布日期:2020/8/15 10:01:00  点击数:638

 杂交膜上有很多非特异性的蛋白质结合位点,为防止这些位点与抗体结合引起非特异的染色和背景,一般用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点来降低抗体的非特异性结合。封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的表位,也不与抗体或检测试剂有交叉反应。常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20(0.05 -百分之 0.1)稀溶液PBS T 或者TBST。

p 百分之5脱脂奶粉或BSA (室温孵育1 h)

p western blot 膜封闭液(生物试剂公司)

p Tween-20的作用:Tween-20是一种非离子型去污剂,有复性抗原的作用,可提高特异性的识别能力。在做westen blot时,用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点可以降低抗体的非特异性结合。Tween 这种非离子型去污剂在乳化蛋白时,不破坏蛋白的结构,可减少对蛋白质之间原有的相互作用的破坏。离子型去污剂如SDS则破坏蛋白的结构。